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《生物化学与分子生物学实验（第2版）》是为适应高等医学院校基础医学实验教学改革和发展的需要而编写的,本生物化学与分子生物学实验教材。《生物化学与分子生物学实验（第2版）》分为基本实验操作及常用仪器使用、经典验证性实验、综合性实验和创新性实验共四篇。在基础理论知识方面，对生物化学与分子生物学的经典研究技术、基本实验操作和常用仪器使用均进行了详细介绍。在实验项目设置上，包括蛋白质定量、层析、电泳、酶学、糖类与脂类、核酸分离纯化、PCR、分子克隆、分子杂交以及RNA干扰、双向电泳、EMSA和ChIP等经典验证性实验、综合性实验和创新性实验。教材内容新颖，体系完整，有所侧重，便于选择。

目录

**篇 基本实验操作及常用仪器使用

第1章 生物化学常用研究技术（1）

第2章 分子生物学常用研究技术（18）

第3章 基本实验操作（23）

第4章 常用仪器使用（34）

第5章 实验室规则及安全防护（46）

第6章 如何撰写实验报告（48）

第二篇 经典验证性试验

第1章 蛋白质定量实验（49）

实验一 双缩脲法测定血清蛋白质含量（50）

实验二 Folin-酚试剂法测定蛋白质含量（52）

实验三 紫外分光尤皮法测定蛋白质含量（54）

实验四 考马斯亮蓝结合法测定蛋白质含量（57）

实验五 BCA法测定蛋白质含量（57）

第2章 层析实验（61）

实验六 纸层析法观察转氨基作用（61）

实验七 葡聚糖凝胶柱层析分离血红蛋白与鱼精蛋白（63）

实验八 离子交换层析分离混合氨基酸（66）

实验九 薄层层析分离鉴定氨基酸（68）

第3章 电泳实验（72）

实验十 血清醋酿纤维薄膜电泳（72）

实验十一 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清LDH同工酶（76）

实验十二 SDS-PAGE测定蛋白质的分子量（81）

第4章 酶学实验（86）

实验十三 血清碱性磷酸酶活性测定（86）

实验十四 血清丙氨酸氨基转移酶活性测定（89）

实验十五 影响且是蛋白酶作用的因素（92）

实验十六 丙二酸对琥珀脱氢酶的竞争性抑制作用（95）

实验十七 酶的非竞争性抑制作用（98）

实验十八 酶米氏常数的测定（100）

第5章 糖类与脂类（103）

实验十九 血糖浓度的测定（103）

实验二十 肾上腺素对血糖浓度的影响（106）

实验二十一 血清甘油二醋浓度测定（108）

实验二十二 血清总胆固醇浓度测定（112）

实验二十三 血清载脂蛋白apoA1的测定（117）

第6章 核酸分离纯化技术（120）

实验二十四 基因组DNA的提取制备与检测（120）

实验二十五 全血基因组DNA的试剂盒法提取制备与检测（124）

实验二十六 总RNA的提取制备与检测（124）

实验二十七 质粒DNA的提取制备与检测（131）

实睡二十八 动物组织核酸的提取及成分鉴定（137）

第7章 Pα技术（140）

实验二十九 常规PCR技术（140）

实验二十 定量PCR技术（144）

第8章 分子克隆技术（148）

实验三十一 DNA的限制性酶切与电泳检测（148）

实验三十二 凝胶中DNA片断的纯化回收（151）

实验三十二 DNA连接实验（153）

实验三十四 感受态细胞的制备（157）

实验三十五 重组DNA转化与蓝白斑筛选（159）

第9章 分子杂交技术（162）

实验三十六 Southern印迹杂交（162）

实验三十七 Northern印边杂交111111（166）

实验三十八 Western印迹（169）

实验二十九 核酸原位杂交（172）

附　核酸分子探针的标记（177）

第三篇 综合性实验

实验一 血清γ球蛋白的分离纯化与鉴定（180）

实验二 碱性磷酸酶的分离纯化与动力学研究（186）

实验三 β肌动蛋白基因的克隆（193）

实验四 hCS在大肠埃希菌中的表达、纯化与鉴定（200）

实验五 hCS基因在毕赤酵母中的表达及鉴定（206）

实验六 荧光原位杂交实验（210）

实验七 双脱氧链末端合成终止法测定DNA序列（213）

实验八 肤或蛋白质N-端氨基酸序列测定（219）

实验九 用双荧光素酶报告基因检测启动子活性（228）

实验十 电泳迁移阻滞实验（232）

实验十一 染色质免疫沉淀（237）

实验十二 蛋白质双向电泳（242）

实验十三 酵母双杂交实验（247）

实验十四 RNA干扰实验（250）

第四篇 创新性实验

实验一 重要蛋白质或酶的分离纯化（255）

实验二 糖尿病的生化及遗传检测分析实验（255）

实验三 家族性高胆固醇血症的诊断（256）

实验四 血友病的分子诊断（258）

实验五 RNA干扰技术靶向沉默目的基因（259）

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书籍介绍

《全国高等院校医学实验教学规划教材:临床基础检验学实验指导》是全国高等院校医学检验专业实验教学系列规划教材之一，全书分八章共52个实验和2个附录。第一章为临床检验基本技术，介绍实验常规器材的使用和基本技术训练；第二章至第六章为临床检验学基本实验技术及验证性实验，按照标准化、规范化操作规程要求，介绍血液、尿液、粪便、生殖系统分泌物、其他体液的常规检验技术，更加注重检验技术与临床实际操作的紧密结合，特别有助于学生把临床检验与诊断相结合，对学生掌握本学科的基本知识、基本技能和今后的临床工作具有参考价值。第七章临床检验技能综合训练及第八章研究应用性实验从综合性、设计性、应用性等多角度出发，介绍了具有重要临床应用价值的基本技术和实验，尤其是对血细胞分析仪的校准、性能评价、检测结果比对、室内质控、室间质评等的阐述，着重强调了临床实验室质量管理，提高检测结果的科学性、准确性和可比性，旨在提高学生对本学科理论和实践的综合运用能力，还可培养学生科研设计能力、实验技能、综合实验能力，为今后的临床工作打下理论和实践的基础。附录介绍了临床检验项目SOP编写要求和医学实验室医疗废物处理及要求，强调了实验室整体管理，增加了《全国高等院校医学实验教学规划教材:临床基础检验学实验指导》实用性。